M13噬菌体表面展示用于铁离子检测及对HIV-1 P24蛋白的检测

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M13噬菌体表面展示用于铁离子检测及对HIV-1 P24蛋白的检测
论文目录
 
摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第一章 绪论第11-19页
  1.1 噬菌体展示技术原理第11-13页
    1.1.1 噬菌体展示系统第12-13页
      1.1.1.1 丝状噬菌体展示系统第12页
      1.1.1.2 T4噬菌体展示系统第12页
      1.1.1.3 T7噬菌体展示系统第12-13页
      1.1.1.4 λ噬菌体展示系统第13页
  1.2 噬菌体展示技术的传统应用第13-16页
    1.2.1 噬菌体多肽文库第13页
    1.2.2 构建cDNA文库第13-14页
    1.2.3 抗原表位作图第14页
    1.2.4 新型疫苗第14-15页
    1.2.5 疾病诊断及治疗第15-16页
  1.3 噬菌体展示技术的跨领域应用第16-18页
    1.3.1 纳米材料第16-17页
    1.3.2 生物传感器第17-18页
  1.4 本文构想第18-19页
    1.4.1 研究目的及意义第18页
    1.4.2 研究内容第18-19页
第二章 M13噬菌体展示酪氨酸用于铁离子检测第19-31页
  2.1 前言第19-20页
  2.2 实验材料第20-21页
    2.2.1 实验涉及菌株第20页
    2.2.2 试剂与材料第20-21页
      2.2.2.1 试剂第20页
      2.2.2.2 仪器设备第20页
      2.2.2.3 培养基配方第20-21页
      2.2.2.4 溶液配方第21页
  2.3 实验方法第21-24页
    2.3.1 噬菌体纯化第21-22页
    2.3.2 KE-Tyr和M13KE对铁离子敏感程度差异第22页
    2.3.3 不同金属离子对KE-Tyr检测铁离子特异性的影响第22页
    2.3.4 构建KE-Tyr检测铁离子标准曲线第22-23页
    2.3.5 透射电子显微镜观察KE-Tyr与铁离子相互作用第23-24页
      2.3.5.1 不同铁离子浓度噬菌体KE-Tyr吸附情况第23页
      2.3.5.2 铁离子对噬菌体KE-Tyr侵染TG1影响第23-24页
  2.4 结果与分析第24-29页
    2.4.1 KE-Tyr和M13KE对铁离子敏感程度差异第24-25页
    2.4.2 不同金属离子对KE-Tyr的影响第25-26页
    2.4.3 KE-Tyr检测铁离子标准曲线第26-27页
    2.4.4 TEM透射电子显微镜结果第27-29页
  2.5 讨论第29-31页
第三章 HIV-1 P24蛋白的噬菌体ELISA检测第31-46页
  3.1 前言第31页
  3.2 实验材料第31-35页
    3.2.1 菌株及质粒第31-32页
    3.2.2 引物第32页
    3.2.3 试剂及材料第32-35页
      3.2.3.1 工具酶类第32页
      3.2.3.2 试剂第32-33页
      3.2.3.3 标准参照物第33页
      3.2.3.4 试剂盒第33页
      3.2.3.5 仪器设备第33页
      3.2.3.6 培养基配方第33页
      3.2.3.7 实验用溶液配方第33-35页
  3.3 实验方法第35-40页
    3.3.1 基因扩增及表达载体构建第35-38页
      3.3.1.1 大肠杆菌质粒的提取第35页
      3.3.1.2 PCR扩增目的基因第35-36页
      3.3.1.3 PCR产物回收第36页
      3.3.1.4 PCR产物与pET-28a (+)载体连接第36-37页
      3.3.1.5 转化大肠杆菌DH5α 感受态细胞第37-38页
      3.3.1.6 重组质粒双酶切验证第38页
      3.3.1.7 转化大肠杆菌BL21感受态细胞第38页
    3.3.2 诱导表达第38-39页
    3.3.3 蛋白纯化第39页
    3.3.4 M13噬菌体gp~3展示单链抗体D2第39-40页
    3.3.5 噬菌体ELISA检测HIV-1 抗原蛋白P24第40页
  3.4 结果与分析第40-44页
    3.4.1 PCR扩增p24基因第40-41页
    3.4.2 p24基因与pET-28a质粒载体的连接与转化第41-42页
    3.4.3 P24蛋白诱导表达第42-43页
    3.4.4 重组噬菌体展示D2检测P24抗原第43-44页
  3.5 讨论第44-46页
第四章 结论第46-47页
参考文献第47-53页
致谢第53-54页
发表论文第54页

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